蛋白组学分析-肽质量指纹谱技术
蛋白质组学是当前生命科学研究的前沿领域。对蛋白质快速、准确的鉴定是蛋白质组学研究中必不可少的关键性的一步。采用MALDI-TOF-MS测得肽质量指纹谱(PMF)在数据库中查询识别的方式鉴定蛋白质,是目前蛋白质组学研究中最普遍应用的最主要的鉴定方法。
磷酸化蛋白质鉴定和定量
对样本进行酶解,TiO2或IMAC富集磷酸化肽段,5600-plus质谱检测,利用得到的质谱谱图与数据库搜索比较,从而得到肽段序列结果,计算出磷酸化位点。磷酸化蛋白选择iTRAQ定量或SWATH定量
相对定量蛋白质组学(Label Free)
非标记定量技术(Label Free)用来比较的样品不经过任何标记,直接酶解后经过质谱分析产生数据。Label Free技术减少了前处理过程中的样品损失,在肽段的检测和蛋白质覆盖率方面具有优势;
修饰技术-泛素化Label Free标记定量
(一类低分子量的蛋白质)分子在一系列特殊的酶作用下,将细胞内的蛋白质分类,从中选出靶蛋白分子,并对靶蛋白进行特异性修饰的过程,与蛋白质降解和功能调控密切相关。泛素化在蛋白质的定位、代谢、功能、调节